基因芯片(又稱DNA芯片、生物芯片)是指將大量序列已知的探針?lè)肿樱ㄍǔC科椒嚼迕c(diǎn)陣密度高于 400 )如寡核苷酸、基因組DNA或互補(bǔ)DNA固定于支持物上的生物芯片,然后通過(guò)與標(biāo)記的樣品分子進(jìn)行雜交,通過(guò)檢測(cè)每個(gè)探針?lè)肿拥碾s交信號(hào)強(qiáng)度進(jìn)而獲取靶分子的數(shù)量和序列信息?;蛐酒夹g(shù)充分利用了分子雜交、分子克隆和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (PCR) 三大分子生物學(xué)技術(shù),借助激光共聚焦顯微掃描技術(shù)可以對(duì)雜交信號(hào)進(jìn)行實(shí)時(shí)、靈敏、準(zhǔn)確的檢測(cè)和分析。
1. 通量高,多參數(shù)同步分析:有利于基因芯片所示圖譜的快速對(duì)照和閱讀,效率大為提高;
2. 多樣性:提供了樣品的多指標(biāo)測(cè)定;
3. 微型化:對(duì)樣品的需要量非常少,而且還能節(jié)省試劑用量,降低成本;
4. 自動(dòng)化:減少人力投入,也極大降低了測(cè)量工作的強(qiáng)度和難度,提高了測(cè)量工作的速度和效率,并保證了質(zhì)量;
(1)集成為芯片實(shí)驗(yàn)室,制備成微型、自動(dòng)化、無(wú)污染、可用于微量試樣檢測(cè)的高度集成的智能化基因芯片;
(2)高精確度分析: 由于芯片上的每個(gè)探針都可以精確定位和選址,加上每個(gè)探針都可以精確設(shè)計(jì)及制備,因此可以精確檢測(cè)出不同的靶基因、同一靶基因不同的狀態(tài)以及在一個(gè)堿基上的差別;
(3)高精密度分析:商品化芯片制作、檢測(cè)試劑和方法的統(tǒng)一在一定程度上保證了芯片檢測(cè)的高精密度和重現(xiàn)性,使不同批次乃至不同實(shí)驗(yàn)室之間的檢測(cè)結(jié)果,可以進(jìn)行有效比對(duì)及分析。
(4)高靈敏度分析:雜交前樣品靶基因的擴(kuò)增和雜交后檢測(cè)信號(hào)的擴(kuò)張,極大地提高了檢測(cè)的靈敏度。
1.SNP芯片
SNP(Single Nucleotide Polymorphism),即單核苷酸多態(tài)性,是由于單個(gè)核苷酸改變(包括轉(zhuǎn)換、顛換、缺失和插入)而導(dǎo)致的 DNA 序列多態(tài)性。SNP 檢測(cè)已廣泛應(yīng)用于疾病易感基因鑒定、標(biāo)記開(kāi)發(fā)和基因定位、群體遺傳學(xué)研究等多個(gè)領(lǐng)域中。
2.基因表達(dá)譜芯片
基因表達(dá)分析芯片可以檢測(cè)基因表達(dá)水平的變化,是近來(lái)基因芯片技術(shù)應(yīng)用最多的一個(gè)方面,自動(dòng)化和快速是它的主要優(yōu)勢(shì),采用cDNA或寡核苷酸片段作探針,將樣品組與對(duì)照樣品的mRNA以兩種不同的熒光分子進(jìn)行標(biāo)記,然后同時(shí)與芯片進(jìn)行雜交,通過(guò)分析兩種樣品與探針雜交的熒光強(qiáng)度的比值,確定基因表達(dá)水平變化?;虮磉_(dá)分析已逐漸成為近年來(lái)基因芯片技術(shù)研究的熱點(diǎn),廣泛應(yīng)用于生物學(xué)與醫(yī)學(xué)的基礎(chǔ)研究、疾病診斷、新藥開(kāi)發(fā)、環(huán)境保護(hù)等許多方面。
3.病原體檢測(cè)及基因分型芯片
病原體(包括如細(xì)菌、病毒、寄生蟲和真菌等)檢測(cè)在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域的應(yīng)用是至關(guān)重要的。建立合理的基因芯片技術(shù)監(jiān)測(cè)病原體,有利于在特定的生物學(xué)環(huán)境中進(jìn)行全面、正確地分析病原體的流行。病原體中流感病毒抗原易遺傳變異,呈周期性爆發(fā),引起中等或嚴(yán)重的呼吸道疾病,高效、迅速的監(jiān)測(cè)和鑒定技術(shù)是非常必要的。
4.甲基化芯片
甲基化芯片是有效的甲基化高通量篩選技術(shù),可捕捉到單個(gè)堿基的甲基化變化,利用芯片掃描儀可分析測(cè)試 DNA 的甲基化水平并與參考 DNA 進(jìn)行比較。甲基化是基因組DNA的一種主要的表觀遺傳修飾形式,與人類的癌癥、衰老、阿爾茨海默癥等許多疾病密切相關(guān)。
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SNP 芯片是高通量的檢測(cè)結(jié)果,因此需要針對(duì)檢測(cè)到的每個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行驗(yàn)證,常用驗(yàn)證方法有 Taqman 探針?lè)?、直接測(cè)序法、Sequenom 法等。
2. 基因芯片技術(shù)有什么應(yīng)用場(chǎng)景?
隨著科學(xué)技術(shù)的創(chuàng)新發(fā)展、新材料的不斷成功研制,基因芯片技術(shù)得到更好的發(fā)展和完善?;蛐酒夹g(shù)在臨床醫(yī)學(xué)、基因診斷、藥物設(shè)計(jì)、基因組計(jì)劃等各個(gè)方面起到關(guān)鍵作用。
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