諾賽基因可以提供專業(yè)，個性化定制的基因組服務，我們擁有先進的儀器設備以及一系列專業(yè)的基因組解決方案，可以確保您得到快速準確的服務以及專業(yè)全面的檢測報告。
一、TA克隆
項目介紹
TA克隆技術(shù)（TA cloning）利用Taq聚合酶具有末端轉(zhuǎn)移酶活性，可在PCR產(chǎn)物的3'端加上一個非模板依賴堿基“A”。T載體是一種高效克隆PCR產(chǎn)物的專用開環(huán)載體。因其3'端帶有一個突出的“T”尾，能高效地與帶“A”尾的PCR產(chǎn)物連接，極大地提高了克隆的效率。TA克隆是目前克隆PCR產(chǎn)物最簡便、快捷的方法。
實驗流程
送樣要求
（2）需要提供克隆片段的相關信息，包括名稱、大小、樣品是否帶有“A”尾以及PCR產(chǎn)物是否已純化。已純化的PCR產(chǎn)物請確保使用的溶劑為滅菌的雙蒸水。
（3）PCR已純化樣品，要求濃度≥20ng/μl，體積≥20μl；PCR未純化樣品，要求濃度≥50ng/μl，體積≥25μl。所需DNA的總量會隨片段大小的不同而有所變化。樣品定量檢測結(jié)果以實際為準。
（4）請務必在訂單上注明 PCR所用引物序列，便于克隆結(jié)果的核對分析。
提供的結(jié)果
（2）要求測通的樣品可以提供拼接序列。
備注：
（1）鑒定結(jié)果以測序序列（或拼接序列）、質(zhì)粒返樣形式呈現(xiàn)。
（2）當克隆結(jié)果中包含客戶提供的單向部分引物序列，即視實驗成功。
（3）若序列中包含高GC、Poly等特殊或復雜結(jié)構(gòu)導致測序中斷，屬于非實驗因素，實驗也屬于成功檢測。
（4）項目完成客戶若無要求返還菌液或質(zhì)粒等，則默認保存一個月后由我司滅菌消毀。（1）E-mail：測序部dnaseq@vip.163.com。
（2）電話訂購：010-67873039/4478，010-67868644；李經(jīng)理：13522520637；王經(jīng)理：15210696931。
（3）QQ咨詢：——————。
（4）相關資料：TA克隆測序訂購表。二、菌種鑒定
項目介紹
菌種鑒定一般是指提取樣品基因組DNA，然后PCR擴增相對應的片段，經(jīng)上機測序之后，在數(shù)據(jù)庫GeneBank比對序列即可。菌種鑒定項目一般采用核酸序列分析法分析細菌16S rDNA/16S-23S rDNA區(qū)間序列、酵母18S rDNA/26S rDNA（D1/D2）序列及絲狀真菌的18S rDNA/ ITS1-5.8S-ITS2序列，提供科學的鑒定結(jié)果。一般序列相似度在98%以上，可以認為是同一個種細菌（DNA序列僅作為一個參考指標）。
實驗流程
送樣要求
菌種鑒定項目的樣本類型一般是沉菌/單菌落菌液/平板（以單菌落/平板為宜）。
送樣要求：
（1）建議務必仔細閱讀、填寫和提交《微生物菌種鑒定評價協(xié)議書》，未填寫協(xié)議書的樣品不予受理。（此項可以參考CICC菌種鑒定與評價服務項目）。
（2）委托鑒定菌株應為非致病菌，且來源明確；若屬于中華人民共和國衛(wèi)生部制定的《人間傳染的病原微生物名錄》之內(nèi)菌株，將停止鑒定實驗。
（3）需要提供送檢樣本的相關信息，包括名稱、培養(yǎng)基相關信息、菌落平板生長時間。且平板樣本需要出現(xiàn)單菌落，建議使用分區(qū)劃線法，避免平板上菌落過于密集生長。
（4）請務必在訂單上注明菌種鑒定詳細需求，一般默認是鑒定到屬。
（5）項目完成兩周后，若客戶無要求返還平板樣品等，則默認滅菌處理。
鑒定結(jié)果一般是以測序序列（或拼接序列）、菌種鑒定報告形式呈現(xiàn)，包括：
（1）菌種鑒定報告（文檔）
（2）測序原始圖譜和序列
（3）樣品拼接序列
三、SNP位點（單核苷酸多態(tài)性分析）檢測
項目介紹
SNP（single nucleotide polymorphism），即單核苷酸多態(tài)性或單堿基多型性，主要是指在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性，是一種較為常見的人類可遺傳的變異。SNP以單個堿基的顛倒、轉(zhuǎn)換、插入和缺失等形式存在。SNP檢測服務是檢測染色體基因組中單個核苷酸的突變而引起的DNA序列的多態(tài)性的技術(shù)服務。作為第三代分子遺傳標記，與其他分子標記相比，SNP分辨率最高也最為豐富，覆蓋基因組范圍大，遺傳上比較穩(wěn)定。
| ??方法 | 儀器平臺 | 單個反應點數(shù) | 應用領域 |
| TaqMan探針法 | 熒光定量PCR | 1-2 | 大量樣本且檢測位點少 |
| 擴增測序方法 | ABI測序儀 | 1-5 | 樣本最少且位點數(shù)少、位點驗證發(fā)現(xiàn)特定區(qū)域內(nèi)的SNP |
| SNaPshot法 | ABI測序儀 | 1-15 | 中等樣本數(shù)且檢測位點數(shù)中等通量 |
| ARMS-PCR 法 | ABI測序儀 | 1-20 | 有長期常規(guī)需求或特大量樣本.如臨床需求、大田作物檢測等。 |
| KASP方法 | 7900PCR儀 | 數(shù)個至數(shù)十 | 技術(shù)成熟，通量越高優(yōu)勢越明顯 |
| MassARRAY 法 | Sequenom質(zhì)譜儀 | 1-30 | 大量樣本且中等通量檢測、不涉及熒光標記的檢測 |
| 芯片法 | SNP芯片 | 數(shù)十萬 | 人源樣本高通量位點檢測 |
| 目標區(qū)域測序/ 重測序 | 高通量測序平臺 | 數(shù)萬至數(shù)百萬 | 全基因組檢測、特定或復雜需求發(fā)現(xiàn)新的SNP |
| 高通量擴增子測序 | 高通量測序平臺 | 數(shù)十至數(shù)萬 | 個性化定制中高通量panel |
送樣要求
SNP位點檢測項目的樣本類型一般是核酸DNA。
（1）需要提供樣本的相關信息，包括樣本名稱及數(shù)量、核酸類型、檢測位點數(shù)量等。
（2）在訂單上注明樣本的檢測需求，根據(jù)不同的方法進行實驗設計。
（3）組織樣品送的核酸樣本≥300mg；血液樣本≥1ml；游離DNA≥1ng；基因組類樣品要求濃度≥50ng/μl，體積≥20μl。
（4）項目完成兩周后，若客戶無要求返還樣品等，則默認為樣品將被處理。
提供的結(jié)果
檢測結(jié)果一般是以測序序列（或拼接序列）和文字表格形式呈現(xiàn)。
可以提供的結(jié)果如下：
（1）設計、合成的SNP位點引物。
（2）測序原始圖譜和序列。
訂購信息
（1）E-mail：測序部dnaseq@vip.163.com。
（2）電話訂購：010-67873039/4478，010-67868644；李經(jīng)理：13522520637；王經(jīng)理：15210696931。
（3）QQ咨詢：——————。
四、實時熒光定量PCR
項目介紹
實時熒光定量PCR（Quantitative Real-time PCR,qPCR）是通過對PCR擴增反應中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時監(jiān)測從而實現(xiàn)對起始模板定量及定性的分析。主要分為熒光染料法（SYBR Green I）和熒光探針法（Taqman 技術(shù)）。
實驗流程
SYBR GreenI是熒光定量PCR常用的DNA結(jié)合染料之一，可以與雙鏈DNA非特異性結(jié)合。SYBR Green I在游離狀態(tài)下會發(fā)出微弱的熒光，一旦與雙鏈DNA結(jié)合，其熒光值會指數(shù)級增加。所以，一個PCR循環(huán)反應發(fā)出的全部熒光信號與雙鏈DNA量呈比例，隨著PCR擴增產(chǎn)物的增加而增加，其熒光信號強度與PCR產(chǎn)物的數(shù)量呈正相關。
熒光探針法（Taqman 技術(shù)）是指PCR擴增時，加入一對引物的同時再加入一個特異性的熒光探針。該探針為一條寡核苷酸，兩端分別標記一個熒光報告基團和一個熒光淬滅基團。探針完整時，報告基團發(fā)出的熒光信號被淬滅基團吸收，PCR 儀檢測不到熒光信號；在PCR擴增時（延伸階段），Taq 酶的5'-3'切酶活性將探針酶切，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)接收到熒光信號。即每擴增一條DNA鏈，即形成一個熒光分子，實現(xiàn)了熒光信號的累積與 PCR 產(chǎn)物形成同步。
送樣要求
實時熒光定量PCR檢測項目的樣本類型一般是核酸。
（1）提供樣本、RS號或NCBI可查詢目的基因的序列號。
（2）提供核酸樣本要求：RNA要求濃度≥20ng/μl，體積≥15μl，OD值接近2.0左右，電泳18s、28s條帶清晰；DNA濃度≥20ng/μl，體積≥25μl，A260/280比值在1.8-2.0。
（3）提供的樣本需要標記詳細的編號、名稱、檢測位點名稱及數(shù)量等。
提供的結(jié)果
檢測結(jié)果一般是以EXCEL原始擴增數(shù)據(jù)和實驗結(jié)果報告形式呈現(xiàn)。
內(nèi)容包括：
（1）設計、合成的檢測位點引物；
（2）原始擴增數(shù)據(jù)EXCEL或曲線圖；
（3）數(shù)據(jù)分析結(jié)果；
（4）檢測報告。
訂購信息
（1）E-mail：測序部dnaseq@vip.163.com。
（2）電話訂購：010-67873039/4478，010-67868644；李經(jīng)理：13522520637；王經(jīng)理：15210696931。
（3）QQ咨詢：——————。
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